一、日常操作規范
試劑準備與檢查
確保試劑瓶（如乙腈、活化劑、氧化劑）密封良好，保持氬氣壓力穩定，防止外界空氣進入影響合成效果。
合成前檢查試劑余量，及時更換空瓶，避免因試劑不足導致合成中斷。
序列輸入與參數設置
通過計算機輔助設計軟件輸入目標DNA序列，考慮密碼子偏好性、二級結構及限制酶位點。
確認合成步驟（如脫保護、耦合、封閉、氧化）是否正確，選擇結束方法（如TritylOnAuto保留5'-DMT基團以便后續純化）。
合成過程監控
啟動前運行StartColumn步驟，檢查合成柱位置是否正確。
合成中通過電導流動池監測DMT陽離子釋放量，判斷反應進度。
定期檢查溫度、壓力等參數是否在正常范圍內。
產物處理
合成完成后，從固相載體上切割產物，采用OPC、PAGE或HPLC純化去除短片段和鹽離子。
純化后產物分裝保存，避免反復凍融。
二、日常維護要點
瓶塞“O”形環
每月檢查一次，每年至少更換一次。若出現白色沉淀，用乙腈棉簽清洗。
更換時用止血鉗夾取舊環，確保插塞無顆粒后安裝新環，并進行壓力測試。
儲液瓶與管路
保持儲液瓶清潔，定期檢查氬氣壓力及管路氣密性。
合成前用新試劑清洗管路，防止舊試劑殘留干擾反應。
流路節流閥
每月清洗一次，先在水中煮沸15分鐘，再用甲醇超聲波清洗，防止阻塞。
儀器清潔與防塵
每周用濕布擦拭外殼，避開通風口；高靈敏度實驗后，用紫外燈照射反應倉15分鐘滅菌。
長期不用時，每周開機1-2次，每次約半小時，防止部件受潮。
三、常見故障排查
合成產率低
原因：試劑失效、管路泄漏、合成柱位置偏差。
解決：更換試劑，檢查管路氣密性，重新校準合成柱位置。
產物純度不足
原因：純化方法不當、合成步驟錯誤。
解決：優化純化條件（如增加HPLC純化步驟），檢查合成參數是否正確。
儀器報警或中斷
原因：廢液瓶過滿、電源波動、溫度異常。
解決：清空廢液瓶，使用穩壓電源，檢查溫度傳感器是否故障。
數據異常（如電導值波動）
原因：電導池污染、試劑混入雜質。
解決：清洗電導池，更換新試劑并重新校準。
四、操作注意事項
無菌環境：引物合成對污染敏感，操作時需佩戴手套，避免外源DNA或酶污染。
試劑保存：乙腈等溶劑需避光保存，活化劑和氧化劑需密封防止受潮。
數據記錄：詳細記錄每批次合成的序列、試劑批號、質檢圖譜，便于追溯問題。
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